УДК 616.61/.63
НОВОЕ В ДИАГНОСТИКЕ МОЧЕКАМЕННОЙ БОЛЕЗНИ
Л.А. Дасаева, В.Н. Шабалин, С.Н. Шатохина,
Е.М. Шилов*
 Традиционные
методы диагностики мочекаменной болезни (МКБ) включают: клинические (в момент
почечной колики), инструментальные (УЗИ или рентгенография), лабораторные (общеклинические, биохимические и иммунологические анализы
крови и мочи) и др. методы, позволяющие определить наличие, местонахождение,
размер конкремента, стадию течения болезни и активность сопутствующего
воспалительного процесса, а также уточнить патогенез развития заболевания.
Представление о химическом составе камня получают из результатов его спектрального
анализа. Этот общепринятый подход является длительным, трудоемким и выполнимым
обычно только в крупных лечебных учреждениях. Однако наибольший интерес для
практики представляют простые и доступные методы диагностики, позволяющие
определять процесс камнеобразования в почках при исследовании мочи. К таким
методам относится метод клиновидной дегидратации биологических жидкостей,
разработанный Шатохиной С.Н. и Шабалиным В.Н. [2-5].
Авторы обнаружили способность солей мочи больных уролитиазом
кристаллизоваться в белковой среде в активную стадию заболевания. Определение
состава неорганических элементов, связанных с белковыми структурами позволило с
помощью рентгеноспектрального микроанализа охарактеризовать вид камнеобразующих солей микролитов почки.
На базе этих разработок была создана новая диагностическая технология - "Литос-система", не имеющая мировых аналогов, в основе которой лежит феномен патологической кристаллизации
солей в белковой среде (феномен Шатохиной -
Шабалина). Известно, что структурной единицей почечного камня является
патологически прочная молекулярная связь "белок - соль", поэтому открытие
данного феномена при исследовании мочи позволяет визуализировать эти нарушения.
Диагностика основана на принципах теории самоорганизации сложных систем и
состоит в выявлении аномальных молекулярных взаимодействий при переходе капли
мочи из жидкого состояния в твердое. Метод клиновидной
дегидратации биологической жидкости заключается в разделении органических и
неорганических веществ в процессе фазового перехода ее из жидкого состояния в твердое (рис.1).
          б
Рис.1. Схема метода клиновидной дегидратации биологической
жидкости: а - сагиттальный разрез, б - вид сверху
 
 В
процессе дегидратации капли мочи концентрация солей по ее краю нарастает
значительно быстрее, чем по центру. В связи с тем, что мощность осмотических
сил значительно выше онкотических, соли перемещаются
к центру капли, где и концентрируются. Органические вещества (белок)
"вытесняются" на периферию капли и при дегидратации формируют краевую белковую
(органическую) зону. В норме в моче молекулярные связи между белком и солями
непрочные, и при дегидратации они легко разделяются и формируют 2 зоны: краевую
белковую и центральную солевую. Дегидратированный
образец биожидкости представляет собой тонкую пленку
и носит название - фация (от лат. - образ).
При камнеобразовании молекулярные связи между белком и солями становятся
патологически прочными, белки "тянут" за собой соль в краевую зону, где
вынуждены кристаллизоваться (рис. 2).
                                                                 а                               б
Рис. 2. Вид
фаций мочи в смеси с белковым Литос-реагентом
(схема): а - при отсутствии процесса камнеобразования в почках, б - при наличии
камнеобразования.
На рис.3 представлены фрагменты натурных
фаций мочи в смеси с Литос-реагентом у больных МКБ.
а
б
Рис. 3.
Фрагменты фаций мочи в смеси с Литос-реагентом у
больных мочекаменной болезнью: а - при отсутствии процесса камнеобразования на
момент исследования, б - при активном камнеобразовании
в почках. Микроскопия в проходящем свете. Ув. 40
Степень активности
процесса камнеобразования определяли по интенсивности кристаллизации солей в
краевой (белковой) зоне фации мочи как слабую (1 степень), умеренную (2
степень) и высокую (3 степень) (рис. 4).
                                                             а               б                          в
Рис. 4. Вид фаций мочи с разной степенью активности камнеобразования:
а - со слабой степенью (1);  б -
умеренной степенью (2); в - высокой степенью (3).
Схема
 
На рис. 5
представлены фрагменты натурных фаций мочи в смеси с Литос-реагентом
больных МКБ с разной степенью активности процесса камнеобразования.
(1)
(2)
(3)
Рис. 5. Фрагменты фаций мочи в смеси с Литос-реагентом
больных МКБ с разной степенью активности камнеобразования в почках: а - слабой
(1), б - умеренной (2), в - высокой (3). Микроскопия в
проходящем свете. Ув. 40
Исследование
проводили с помощью специальной тест-карты (рис. 6).
Она состоит из паспортной части, регистрационной и четырех окон для нанесения
мочи. Два окна выполнены из специальной алюминиевой фольги и предназначены для
определения состава камнеобразующих солей мочи при
наличии у пациента МКБ в активной стадии. Два другие окна выполнены из специального прозрачного пластика. В одно из них наносится
капля (0,02 мл) нативной мочи, в другое - капля (0,02
мл) смеси мочи с белковым Литос-реагентом.
В исследуемой порции мочи общепринятыми методами проводилось качественное
определение глюкозы и белка. При наличии белка в моче делалась соответствующая
отметка в регистрационной части тест-карты. Полуавтоматическим
дозатором нативная моча (контроль) наносилась в два
окна (N 1 и N 2). Затем готовили смесь мочи и белкового реактива в соотношении
4:1 и наносили по капле в два других окна N 3 и 4). Карту высушивали при
температуре 20-25¦С и относительной влажности 55-60% .
Через 24 часа визуально определяли наличие или отсутствие краевой аморфной
(белковой) зоны в фации мочи в окне из прозрачного пластика. 
  Фации мочи изучали с помощью стереомикроскопа
MZ12 фирмы "Leica" с выводом объекта
изображения на экран компьютера ("Reichert-Jung",
Австрия) при увеличении 10-100 крат. Для определения вида камнеобразующих
солей мочи применяли метод рентгеноспектрального микроанализа (РСМА), являющегося
составной частью "Литос-системы".
Рентгеноспектральный
микроанализ (РСМА). Исследование
состава дегидратированных образцов мочи на тест-картах "Литос-системы"
выполняли на приборе "Camebax"
фирмы "Cameca" (Франция),
представляющем собой микроанализатор, снабжTнный оптическим (´400) и электронным сканирующим (до ´4000) микроскопами. Анализ проводили с
применением системы "LinK" QX2000 фирмы "Link Analytical Limited" (Англия). Для рентгеноспектрального
микроанализа тест-карты направляли в лабораторию
морфологии биологических жидкостей Российского НИИ геронтологии МЗ РФ. На
рис. 7 представлена схема проведения исследований.
Рис.6. Вид тест-карты диагностического
набора "Литос-система".
 
Рис. 7. Схема определения
состава химических элементов в образце мочи. Стрелками указаны локусы в краевой
и центральной зонах, в которых определяли спектр
химических элементов
Рис. 8. Карта распределения камнеобразующих
солей мочи по данным рентгеноспектрального микроанализа ("Литос-система")
Определение вида камнеобразующих
солей мочи шло по расчету коэффициента соотношений по кальцию и
фосфору в краевой и центральной зонах образца мочи, например, КCa = ЕИCa кр./ ЕИCa центр., где КCa -  коэффициент соотношений по кальцию, ЕИCa кр. - содержание кальция в единицах интенсивности в
краевой зоне образца смеси мочи с Литос-реагентом, ЕИCa центр. - содержание кальция в
единицах интенсивности в центральной зоне образца смеси мочи с Литос-реагентом. При наличии патологической
кристаллизации солей в краевой белковой зоне образца мочи и отрицательном
коэффициенте по кальцию и фосфору, камнеобразующими
элементами являлись ураты. При положительном
коэффициенте по кальцию - камнеобразующей солью
являлся оксалат кальция, при положительных коэффициентах по фосфору и кальцию -
фосфатно-кальциевые соли (рис. 8). Новая диагностическая технология успешно
апробирована при динамическом наблюдении за активностью процесса камнеобразования
у 409 пациентов в процессе лечения [1]. Новая диагностическая технология
исследования мочи - "Литос-система" - позволяет
определить процесс камнеобразования в органах мочевой системы, степень его
активности и вид камнеобразующих солей. Основное
достоинство метода - диагностика МКБ до стадии формирования камня в почке.
1. Дасаева Л.А. Возрастные
особенности мочекаменной болезни у специалистов геологической отрасли, новые
подходы к диагностике, профилактике и лечению: Автореф.
дис...д.м.н.- М., 2003.- 44
с.
2. Шатохина С.Н., Шабалин В.Н. // Урология и нефрология.-
1998.- N 1.- С. 19-23.
3. Шатохина С.Н. // Урол.
и нефрол.- 1998.- N 2.- С. 16-19.
4. Шатохина С.Н. Диагностическое значение
кристаллических структур биологических жидкостей в клинике внутренних болезней:
Автореф. дис... д.м.н.- М.,
1995.- 40 с.
5. Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. Морфология биологических жидкостей
человека.- М.:  Хризостом,
2001.- 304 с.
 
New Findings in
Diagnosis of Urolithiasis
L.A. Dаsaуeva, V.N.
Shabalin, S.N.Shatokhina, E.M. Shilov
The article presents and
demonstrates a new diagnostic technique of urine testing - "Lithos-System",
which allows to determine the formation of calculi in urinary organs, the level
of its activity, and the type of stone-forming salts. It features a detailed
discription of both the application of the methods and its diagnostic
advantages.
Key words:
diagnosis, lithos system, uroliyhiasis, discription